改变加入黄嘌呤的氨基浓度

2.4 肉桂醛缩氨基脲对XOD抑制常数

以黄嘌呤为底物，肉桂研究了肉桂醛缩氨基脲对黄嘌呤氧化酶活性的醛缩抑制常数。改变加入黄嘌呤的氨基浓度，加入0.1mL酶活为0.2U/mL的脲对黄嘌呤氧化酶，加入肉桂醛缩氨基脲使体系内终浓度分别为O、黄嘌化酶30、呤氧40、制作60μmol/L，用研测定不同浓度肉桂醛缩氨基脲对酶活性的肉桂影响。抑制类型由Lineweaver-Burk双倒数作图法来判断。醛缩纵坐标是氨基反应速率的倒数，横坐标是脲对底物浓度的倒数，作图，黄嘌化酶试验结果见图4(a)，呤氧显示一组直线相交于第二象限，制作推测出肉桂醛缩氨基脲不仅能够与酶底物复合物结合，还能与游离酶结合，说明肉桂醛缩氨基脲抑制黄嘌呤氧化酶活性的类型为混合型抑制作用。纵坐标是直线斜率，横坐标是肉桂醛缩氨基脲浓度，作图，可以计算出肉桂醛缩氨基脲的抑制常数K1，即抑制剂与酶的亲和能力(见图4(b))。纵坐标是Y轴截距，横坐标是肉桂醛缩氨基脲浓度，作图，可以计算出肉桂醛缩氨基脲的抑制常数KIS，即抑制剂对酶底物复合物的亲和能力(见图4(c))。试验结果显示，肉桂醛缩氨基脲抑制黄嘌呤氧化酶活性的类型为混合型可逆抑制，抑制常数K_I为27.25μmol/L，K_IS为50.30μmol/L。

2.5 肉桂醛缩氨基脲对小鼠血尿酸质量浓度、血清XOD和肝脏XOD活性的影响

由图5可知，模型组与正常对照组相比，造模后小鼠的血尿酸质量浓度显著升高(p＜0.05，n=10)，表明造模成功。与模型组小鼠相比，肉桂醛缩氨基脲组小鼠的血尿酸质量浓度降低，差异显著(P＜0.05，n=10)。活性顺序是：别嘌呤醇＞肉桂醛缩氨基脲＞肉桂醛。

由图6可知，模型组与正常对照组相比，造模后小鼠血清XOD活性显著升高(p＜0.05，n=10)，表明造模成功。与模型组小鼠相比，肉桂醛缩氨基脲组小鼠血清XOD活性降低，差异显著(P＜0.05，n=10)。活性顺序是：别嘌呤醇＞肉桂醛缩氨基脲＞肉桂醛。

由图7可知，模型组与正常对照组相比，造模后小鼠肝脏的XOD活性显著升高(p＜0.05，n=10)，表明造模成功。与模型组小鼠相比，肉桂醛缩氨基脲组小鼠的肝脏的XOD活性降低。差异显著(P＜O.05，n=10)。活性顺序是：别嘌呤醇＞肉桂醛缩氨基脲＞肉桂醛。
 

3 结语

作者研究了肉桂醛缩氨基脲对黄嘌呤氧化酶的抑制作用。合成、表征了肉桂醛缩氨基脲，以黄嘌呤为底物，测定了肉桂醛缩氨基脲对黄嘌呤氧化酶活性的IC₅₀、抑制类型和抑制常数。研究了肉桂醛缩氨基脲对小鼠血尿酸质量浓度、血清XOD活性和肝脏XOD活性的影响。肉桂醛缩氨基脲对黄嘌呤氧化酶活性抑制效果显著，IC₅₀为55.48μmol/L，是混合型可逆抑制，抑制常数K_I为27.25μmo儿，K_IS为50.30μmol/L。与模型组相比，肉桂醛缩氨基脲能显著降低小鼠血尿酸质量浓度、血清XOD活性和肝脏XOD活性，差异显著(P＜0.05，n=10)。活性顺序：别嘌呤醇＞肉桂醛缩氨基脲＞肉桂醛。总之，肉桂醛缩氨基脲对黄嘌呤氧化酶活性抑制效果显著，能显著降低小鼠血尿酸质量浓度、血清XOD活性和肝脏XOD活性，是降低尿酸、防治痛风的候选药物。

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